甲型H1N1流感的检验诊断标准
今年3月,在墨西哥和美国先后发生的流感病原是新的甲型H1N1病毒,现已在世界上许多国家发生并传播,引起世界卫生组织和各国政府的广泛关注,积极采取严格措施防范其传播。此次的流感病毒是老病毒的新变种。流感病毒属于正粘病毒科,是单股负链的RNA病毒。它分为甲型(A)、乙型(B)和丙型(C)。病毒表面有许多突起的糖蛋白分子,主要是血凝素(H)和神经氨酸酶(N),又根据它们的抗原性的差别而分为16个H亚型(H1-H16)和9个N亚型(N1-N9)。所以,H1N1是血凝素1和神经氨酸酶1的型别组合。这些亚型的抗原还在不断地变异,由量变到质变就出现新的型别。这次的甲型H1N1就是新型。因为甲型H1N1在1918年曾引起世界的大流行(西班牙流感)。1957年有H2N2的大流行(亚洲流感),1968年有H3N2的大流行(香港流感),1977年又是H1N1变种的流行(俄罗斯流感)。这次的甲型H1N1可能是它在人体、动物体内或环境中发生了新的变异。
为及时有效地防控甲型H1N1流感,我国卫生部及时发布了诊疗方案。由于目前我国大多数病例为输入型病例,重点在防控经航空途径的传播。与疑似或确诊患者密切接触的人群为医学观察病例,有接触史又有症状者为疑似病例,经检验诊断为甲型H1N1阳性者为确诊病例。可见关键在有无检验诊断的证据,检验的证据在明确诊断中至关重要。那么,检验诊断的证据有哪些呢?
一、甲型H1N1流感病毒的核酸扩增。自患者的呼吸道标本(如鼻咽部分泌物,口腔含漱液,气管吸出物或呼吸道分泌物等)用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)来扩增出此病毒的特异性核酸片段,按照核酸片段的大小加以鉴定,可在取样本后2小时得出结果。我国卫生部已规定了标准化的试验方法,由各级疾病控制中心来实施和发出报告,可迅速、可靠地做出诊断。
二、细胞培养的方法分离甲型H1N1流感病毒。这种方法需要的时间较长,但它是最可靠的确诊方法。分类的病毒可用来分析它的基因改变,了解流行趋势,对判断它在世界范围内的流行规律会有极大价值。更重要的是,有了病毒株才能制作疫苗。最近,我国已从世界卫生组织获得了标准的毒株,并由我国多个疫苗生产机构加速生产疫苗。由重点人群(发生病例地区的周围人群、老人、小儿等)开始的普遍接种疫苗是防控甲型H1N1最可靠的方法。用细胞培养的方法分离甲型H1N1流感病毒,需要的时间较长,技术要求也高,但这是最可靠的确诊方法。
三、快速的甲型H1N1流感抗原检查。现有快速检测工具可自患者的呼吸道标本(如上述),用免疫学技术以已知的抗体,来检查标本中的病毒核蛋白抗原(NP抗原)或基质蛋白(M1)或流感病毒H亚型抗原。这对及时发现疑似病例或不具备核酸扩增条件时可起到一定作用,但仍需进一步施以核酸扩增阳性或血清学检查阳性才可判断为确诊病例。
四、血清学检查。在患者发病的初期采取血液检查甲型H1N1流感病毒的抗体,这时多为阴性或较低的抗体滴度。经2周后即有抗体的明显升高。所以在患者的恢复期再采血测定,如有抗体的4倍升高,表明患者确实有过此流感病毒的感染,也为确诊病例。这对流行病学调查和了解人群中的抗体水平及判定疫苗的效果则是重要手段。
五、辅助诊断指标。患者的血液白细胞计数不升高或降低。重症患者常有白细胞及淋巴细胞的减少,常有血小板的减低。
甲型H1N1流感对人类的威胁所以巨大,其主要原因是人类对此新的流感病毒全然没有免疫力。1957年前以出生的人可能感染或接触过H1N1病毒,但体内的抗体也已很低且对目前的H1N1流感病毒的针对性不强。因此,预防的重要手段就是疫苗接种,我国即将大量生产。但随着流感病毒抗原的变异,疫苗的针对性也需改变。可以说,对流感的预防接种不可能有一劳永逸的疫苗。