乙肝定量PCR检测系统
乙肝病毒DNA,乙肝病毒的英文缩写为HBV,因此化验单上往往写成“HBV-DNA”。DNA的检查也可以称作基因诊断,目前最常用的是“PCR法”。PCR是一种分子生物学方法,它的全称为:聚合酶链反应。这种方法是用一些特殊的仪器,将非常微量的DNA扩大百万倍,因此,灵敏度非常高。
PCR病毒实验室的重要作用
PCR检测技术对软硬件环境要求条件相当严格,并不是一般的医院都能开展的,开展“PCR”检测必须具备以下条件:
A、必须拥有标准的的PCR荧光实验室
B、检测设备必须符合标准PCR荧光实验室设置要求
C、必须通过国家临床检验中心的验收和认证
D、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书
E、必须在无菌无尘环境下进行操作
常规PCR法HBV-DNA检测的临床意义
常规PCR法HBV—DNA定量检测独特的诊断价值表现:
1、常规PCR法HBV-DNA检测施治前进行病毒定量检测,可以选择针对性的药品,避免盲目用药。
2、常规PCR法HBV-DNA检测施治后定量PCR可直接准确地测定体内病毒数量,有助于判断治疗乙肝的效果
3、常规PCR法HBV-DNA检测妊娠前进行定量PCR测定,有助于选择有益的妊娠机会。乙肝妊娠期的妇女进行定量PCR检查,有助于使部分患者得到及时、正确的诊断。
宁夏康元泽润医院专家温馨提醒:PCR检测的结果是非常重要的,但是患者从抽血到拿到检查结果的全过程,有许多因素会影响到检测结果的准确性。控制这些因素的主要部门是医院的化验室。按照医疗行政部门的要求,凡是开展PCR检测的实验室必须达到必要的标准,包括做试验的房间结构是否合理、人员是否培训上岗和化验使用的试剂是否被国家批准等。在不具备条件的实验室不应进行PCR检测,往往容易出现“假阳性”,不能保证结果的可靠性、准确性,一些小的诊所和门诊部不具备实验室条件。因此,需要检查乙肝DNA的患者,最好到具备条件的卫生部批准的具备检测资质的医院进行检测,使自己的血液检查得到一个可靠的结果,这样才能正确地指导治疗用药。
获得诺贝尔奖的PCR技术
1995年,美国科学家Mulis众望所归地获得了诺贝尔化学奖,他所取得的成就是发明了PCR技术。
PCR,中文译为聚合酶链式反应,其实是一种DNA的快速扩增技术,其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”那样。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。这种技术一问世,立刻引起了分子生物学研究的一场革命,人们利用这种轰动全世界的技术很快就把微观领域的生物学研究大大地往前推了一步。可以这么说,PCR技术使分子生物学研究一下子获得了突破,而且随着PCR技术的日趋完善,PCR在人类社会生活中的应用也越来越广泛。
比如说在“DNA指纹”中我们提到,科学家们只需要一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA指纹的鉴定工作,这里实际上就要采用PCR技术,因为一个细胞中的DNA含量实在太少了,人们根本不可能检测到它的指纹;有了PCR技术就好办了,通过PCR技术把这个细胞中的DNA片断扩增1000万倍,这样DNA量就足够作指纹鉴定了。
再比如,在医院里检验血液中的某种病毒,有时病毒量极少(例如有的艾滋病病毒携带者),通过传统的检查方法费力又费时,这时PCR技术也许就可以帮上忙。可以先选定这种病毒DNA上的一段DNA,设计合适的引物DNA,然后通过PCR技术一扩增很快就可以判断出血样中是否扩增出了大量的DNA,如果是的话,那么就说明血样中带有该种病毒了。PCR方法不但有极高的灵敏度,而且可以同时一次做近百个扩增反应,省时省力效率高。
PCR技术神奇就神奇在以下几个特点上:一是被扩增的DNA所需量极小,理论上讲一个分子就可以用于扩增了,二是扩增效率高,几个小时就扩增1000万倍以上。现在PCR技术已经被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面,真不愧是“获得诺贝尔奖”的好技术!